Invitrogen™ ProcartaPlex Panneau des voies JAK-STAT humain (phospho), 6plex

Le panneau est validé pour une utilisation avec des lysats cellulaires. Pour la préparation des lysats cellulaires, nous recommandons l’utilisation d’un ProcartaPlex tampon de lyse cellulaire (Cat. Non. EPX-99999-000) ou tampon d’extraction cellulaire (cat. Non. FNN0011) complétée avec 0,5 M EDTA et Halt Protease and Phosphatase Inhibitor Single –Use Cocktail 100X (Cat. No 78440 ou 78442). Ces tampons ne sont pas inclus dans le panneau. Selon votre système cellulaire, d’autres tampons peuvent aussi convenir.

Ce kit est compatible avec tous les Luminex instruments. Si vous utilisez un xMAP instrument INTELLIFLEX DR-SE, nous recommandons notre ProcartaPlex Human JAK-STAT Pathway Dual Reporter Panel, 2x6plex (Cat. Non. EPX060-97224-DR), qui permet la quantification simultanée des protéines totales et phosphorylées sur la même bille dans un seul puits.

Le panel est fourni dans un format prêt à l’emploi, avec des fioles individuelles de réactifs de capture et de détection formulées à une concentration de 1X, nécessitant moins de pipetage et de mise en place expérimentale.

ProcartaPlex Les panneaux préconfigurés sont largement testés pour la combinabilité de l’analyte, l’interférence et la réactivité croisée afin d’offrir le plus haut niveau de validation et de précision. Tous ProcartaPlex les panneaux sont fournis avec les réactifs nécessaires pour effectuer le test.

Cibles [région de billes] : STAT1[pY701] [73], STAT3[pY705] [29], STAT6[pY641] [75], JAK2[pY1007/1008] [55], FYN[pY530] [78], SRC[pY416] [20]

À propos ProcartaPlex des tests pour la Luminex plateforme

ProcartaPlex Les immunotests sont basés sur les principes d’un sandwich ELISA, utilisant deux anticorps très spécifiques se liant à différents épitopes d’une même protéine pour quantifier simultanément toutes les cibles protéiques à l’aide d’un Luminex instrument. ProcartaPlex Les tests multiplex nécessitent aussi peu que 25 μL de plasma ou de sérum, ou 50 μL de surnageant en culture cellulaire, et seulement quatre heures pour obtenir les résultats analysés.

• Plus de résultats par échantillon—mesurent plusieurs cibles protéiques simultanément dans un seul échantillon de 25 –à 50 μL
• Une Luminex technologie—bien établie a largement référencé une plateforme de multiplexage pour la détection et la quantification des protéines

ProcartaPlex Les essais utilisent Luminex xMAP la technologie (profilage multianalyte) pour la détection et la quantification simultanées de jusqu’à 80 cibles protéiques dans un seul échantillon de 25 –à 50 μL provenant de plasma, sérum, surnatants de culture cellulaire et autres fluides corporels.

Les Luminex billes de l’essai ProcartaPlex sont teintes en interne avec des proportions précises de fluorophores rouges et infrarouges afin de créer des signatures spectrales uniques pouvant être identifiées par les Luminex xMAP systèmes de détection (par exemple Luminex 200, FLEXMAP 3D, et MAGPIX). À l’instar d’un sandwich ELISA, le ProcartaPlex test utilise des paires d’anticorps appariées pour identifier la protéine d’intérêt. Dans un test multiplexé, chaque bille spectrale unique est marquée avec des anticorps spécifiques à une protéine cible unique, et les protéines liées sont identifiées avec des anticorps biotinylés et de la streptavidine –R-phycoythrine (EPR). La conjugaison des anticorps spécifiques à une perle distincte permet d’analyser plusieurs cibles dans un seul puits.

La différence la plus significative entre un ProcartaPlex test et ELISA est que l’anticorps de capture dans le ProcartaPlex test est conjugué à une bille et non adsorbé au puits de la microplaque, donc les ProcartaPlex réactifs du test flottent librement dans la solution. Pour la détection, l’instrument Luminex 200 , par exemple, contient deux lasers, l’un pour distinguer la signature spectrale de chaque bille et l’autre pour quantifier la quantité de fluorescence RPE, qui est proportionnelle à la quantité de protéine présente dans l’échantillon. ProcartaPlex Les tests multiplex peuvent profiler davantage de protéines cibles en utilisant beaucoup moins d’échantillons dans le même temps que pour réaliser un sandwich ELISA traditionnel.

ProcartaPlex Les panneaux multiplexes sont disponibles en plusieurs formats pour six espèces (humain, souris, rat, primate non humain, porcin et chien). Visitez thermofisher.com/procartaplex pour plus d’informations, y compris une liste complète des cibles protéiques individuelles.