Thermo Scientific™ Pierce™ Agarose de la protéine recombinante A

L’agarose de la protéine recombinante Pierce A utilise une forme génétiquement modifiée de la protéine A, produite dans E. coli puis immobilisée sur de l’agarose perlé réticulé à 6% (CL-6B). Bien que certaines régions non essentielles aient été retirées, le recombinant est similaire à la protéine A native en taille globale et en domaines de liaison à l’IgG. La protéine possède quatre sites de liaison à haute affinité capables de se lier spécifiquement à la région Fc des molécules d’immunoglobuline de plusieurs espèces. Certains chercheurs préfèrent utiliser une résine d’affinité basée sur la forme recombinante de la protéine A dans des applications particulières où l’expérience pratique indique que la source de production différente (E. coli vs . S. aureus) offre moins de liaison non spécifique ou des niveaux plus faibles de contamination par des endotoxines. Sinon, les résines natives de la protéine A offrent généralement une purification des anticorps à plus grande capacité.

Points clés :

• La protéine A – immobilisée se lie spécifiquement à l’IgG de plusieurs espèces de mammifères, en particulier la plupart des sous-types d’IgG humains et de lapins
• La capacité – standard de la protéine A immobilisée fournit une capacité de liaison de 15 à 17 mg d’IgG humain par millilitre de résine
• Agarose réticulée – en résine croisée à 6% pour les méthodes de purification par affinité en petites colonnes ou en batch

Propriétés de l’agarose réticulé à 6 % en perles (CL-6B) :

• Soutient la stabilité du pH : 2 à 14 (à court terme); 3 à 13 (à long terme)
• Taille moyenne des particules : de 45 à 165 microns
• Limite d’exclusion : de 10 000 à 4 000 000 daltons (Da)
• Débit volumique maximal : env. 1 ml/minute (pour une colonne de 1 cm de diamètre)
• Vélocité linéaire maximale : 30 cm par heure
• Pression maximale : moins de 1,5 bar (25 psi), définie comme la chute de pression maximale dans une colonne à laquelle la résine peut résister (Remarque : La pression manométrique indiquée d’un appareil de chromatographie liquide peut mesurer la pression totale du système plutôt que la chute de pression dans la colonne.