Invitrogen™ Sondes de marquage des phaloïdines

Une variété de conjugués de phalloïdines pour la coloration filamenteuse (F-actine) est disponible, incluant les phalloïdines fluorescentes Alexa Fluor et Alexa Fluor Plus, ainsi que des phalloïdines conjuguées à des colorants fluorescents classiques tels que BODIPY la fluorescéine et la rhodamine. La coloration par phaloïdine est spectralement compatible avec d’autres colorations fluorescentes utilisées dans les analyses cellulaires telles que la GFP/RFP, Qdot les nanocristaux et d’autres Alexa Fluor conjugués et anticorps. La phaloïdine biotine-XX peut être utilisée pour visualiser des filaments d’actine via des marqueurs fluorescents de streptavidine ou des techniques standard d’avidine/streptavidine médiées par enzymes, comme en microscopie électronique. La phalloïdine non marquée est disponible pour être utilisée comme contrôle dans le blocage de la coloration par F‐actine ou pour favoriser la polymérisation.

Les conjugués de phaloïdine se lient aux filaments d’actine gros et petits avec une affinité similaire dans une stœchiométrie 1:1 entre les sous-unités de phallotoxine et d’actine. Ils ne lient pas les monomères de G-actine.

Alexa Fluor et Alexa Fluor Plus les conjugués de phalloïdine pour la coloration F-actine

Les colorants fluorescents Alexa Fluor conjugués de la phalloïdine sont des colorants F-actine populaires, offrant des choix de couleurs sur toute la gamme spectrale. Ces conjugués phalloïdines fournissent aux chercheurs des sondes fluorescentes supérieures en luminosité et photostabilité à d’autres conjugués spectrales similaires.

Alexa Fluor De plus, les conjugués de phaloïdine conservent la même spécificité pour l’actine mais offrent une sensibilité et une luminosité 3 à 5 fois supérieures à celles du conjugué de phaloïdine correspondant Alexa Fluor . Cette luminosité accrue est bénéfique pour l’imagerie complexe de la F-actine, comme les méthodes de microscopie à superrésolution SIM et STORM, ainsi que pour la coloration fiable des fibres de stress à l’actine.

Caractéristiques des sondes phalloïdines

• Une—haute spécificité se lie sélectivement à la F-actine, ce qui permet un marquage précis des filaments d’actine dans les cellules fixes et les tissus cryopréservés
• Forte affinité—de liaison nanomolaire pour la F-actine, ce qui assure une coloration stable et fiable à l’actine
• De nombreuses options—conjuguées fluorescentes sur vingt variétés conjuguées de phalloïdine
• Compatibilité avec des échantillons—fixes généralement utilisés avec des cellules et tissus fixes, ce qui les rend adaptés à la coloration à l’actine dans des études structurelles détaillées, la coloration par immunofluorescence et les applications IHC
• Capacité—de multiplexage La large disponibilité des conjugués de phalloïdines permet leur utilisation en combinaison avec d’autres sondes fluorescentes et anticorps pour l’imagerie multiplexée. La phalloïdine biotinylée peut être utilisée dans les étapes aval de la streptavidine.
• L’analyse—quantitative peut être utilisée pour l’analyse quantitative de la distribution et de la densité de la F-actine au sein des cellules, aidant à l’étude de la dynamique du cytosquelette. La phalloïdine non marquée peut être ajustée comme contrôle.
• La teinture facile à utiliser—est simple et rapide
• Une excellente stabilité—démontre une bonne photostabilité, ce qui est essentiel pour les séances d’imagerie prolongées et les études en accéléré
• Une large applicabilité—utilisée pour une gamme d’applications, notamment l’étude de la morphologie cellulaire, de la motilité et des effets des médicaments sur le cytosquelette de l’actine