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Invitrogen™ Click-iT™ Plus kit de synthèse protéique OPP Alexa Fluor™ 594
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Numéro de catalogue. C10457
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Numéro de catalogue. C10457 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur C10457

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Comprend

Click-iT Réactif OPP, Alexa Fluor colorant picolyl azide, Click-iT tampon de réaction OPP, protecteur de cuivre, Click-iT additif tampon de réaction, Click-iT tampon de montée de réaction et NuclearMask™ tache bleue

Fournit une méthode non radioactive pour la détection de la synthèse protéique à l’aide de la microscopie à fluorescence ou de l’imagerie à haute teneur

The Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 594 Protein Synthesis Assay Kit provides a fast, sensitive, and non-radioactive method for the detection of protein synthesis using fluorescence microscopy or high-content imaging. In this assay O-propargyl-puromycin (OPP) is efficiently incorporated into newly translated proteins in complete methionine-containing media and fluorescently labeled with a bright, photostable Alexa Fluor™ dye in a fast, highly-specific, and mild click reaction.

Le Click-iT™ kit de synthèse des protéines Plus OPP Alexa Fluor™ 594 offre une méthode rapide, sensible et non radioactive pour la détection de la synthèse protéique à l’aide de la microscopie à fluorescence ou de l’imagerie à haute teneur. Dans cet essai, l’O-propargyl-puromycine (OPP) est efficacement incorporée dans les protéines nouvellement traduites dans un milieu complet contenant de la méthionine et marquée fluorescentement avec un colorant brillant et photostable Alexa Fluor™ lors d’une réaction rapide, très spécifique et légère.

Les caractéristiques du kit incluent :

• Aucun changement de milieu nécessaire—ne fonctionne dans des milieux complets contenant de la méthionine, pas besoin de retirer les milieux
• cellulaires. La technologie Click-iT™ Plus compatible—multiplex retient le signal de la GFP et de la liaison des phalloïdines
• conjuguées fluorescentes. Non radioactive—, une alternative aux méthodes
• traditionnelles à 35S-méthionine. Des résultats publiés in vivo—démontrent une utilisation in vivo pour la détermination de la traduction

des protéines.Le kit contient de l’O-propargyl-puromycine (OPP), qui est un analogue alkyne de la puromycine (également disponible séparément), ainsi que Alexa Fluor™ 594 picolyl azide et tous les réactifs nécessaires pour effectuer la réaction Click. L’OPP est transmis aux cellules cultivées et incorporé dans les protéines lors de la synthèse protéique active. L'ajout des Alexa Fluor™ réactifs 594 picolyl azide et de la réaction Click conduit à une ligature chimiosélective, ou réaction « clic », entre le colorant picolyl azide et l'alkyne OPP, permettant de détecter les protéines modifiées par analyse basée sur des images.

La réaction de clic utilise des moitiés bioorthogonales (biologiquement uniques) pour marquer les cellules proliférantes par fluorescence, contribuant à produire de faibles fonds de fond et de fortes sensibilités à la détection. En raison des conditions de réaction douces, Click-iT™ les tests Plus détectent les événements de traduction des protéines tout en permettant la préservation de la morphologie cellulaire, de la liaison de la phalloïdine marquée fluorescentement et du signal fluorescent provenant de la GFP.

Contrairement à la 35S-méthionine, utilisée dans les méthodes traditionnelles, l’OPP n’est pas un analogue d’acides aminés, elle peut donc être ajoutée directement aux cellules dans un milieu complet ou utilisée pour déterminer la synthèse des protéines in vivo.

Le kit contient tous les composants nécessaires pour marquer et détecter l’OPP incorporé dans les protéines nouvellement traduites dans des échantillons de cellules adhérentes. Le kit comprend suffisamment de réactifs pour l’étiquetage de 25 caches de 18 mm × 18 mm utilisant 1 mL de tampon de réaction par test.

Spécifications

À utiliser avec (application) Détection de la synthèse protéique par microscopie à fluorescence ou imagerie à haute teneur
Type de produit Click-iT™ Plus kit de synthèse protéique OPP Alexa Fluor™ 594
Quantité 1 kit
Contenu et stockage Ce kit contient : Click-iT™ Réactif OPP, Alexa Fluor™ colorant picolyl azide, Click-iT™ tampon de réaction OPP, protecteur au cuivre, Click-iT™ additif tampon de réaction, Click-iT™ tampon de montée de réaction et NuclearMask™ teinture bleue. Conserver à 2° à 8 °C. Dessécher et protéger de la lumière.
Type de réactif Réactif de marquage protéique naissant
Gamme de produit Click-iT
Étiquette ou colorant Alexa Fluor 594