Invitrogen™ Click-iT™ Plus kit de prolifération cellulaire EdU pour imagerie, Alexa Fluor™ colorant 488

Click-iT De plus, les kits d’imagerie de prolifération cellulaire EdU ont été optimisés pour des applications de microscopie à fluorescence et constituent une alternative supérieure aux tests traditionnels de prolifération. Dans cet essai, l'analogue modifié de thymidine EdU (5-ethynyl-2'-désoxyuridine, un analogue nucléoside de la thymidine) est efficacement incorporé dans l'ADN nouvellement synthétisé et marqué fluorescentement avec un colorant brillant et photostable Alexa Fluor™ dans une réaction rapide, très spécifique et légère par clic.

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en prolifération Simple fonctionne du premier coup, à chaque fois, en moins de temps que les méthodes
• traditionnelles Efficace—, aucune étape de dénaturation ni traitement sévère requis
• Des résultats—riches en contenu ont amélioré la préservation de la morphologie cellulaire, de la structure antigénique, du signal fluorescent GFP et de l’intégrité
• de l’ADN Consistance—non dépendante de lots variables d’anticorps pour la détection

— •Le kit contient tous les composants nécessaires pour marquer et détecter l’EdU incorporé ainsi que pour effectuer une analyse du cycle cellulaire sur des échantillons provenant de cellules adhérentes. Pour l’analyse du cycle cellulaire, le kit comprend un colorant fluorescent Hoechst bleu 33342. Le kit contient suffisamment de réactifs pour marquer 50 couches de couverture de 18x18 à l’aide de 500 μL de tampon de réaction par test.

Évitez les traitements sévères associés à la méthode
BrdU Mesurer les changements dans la prolifération cellulaire est une méthode fondamentale pour évaluer la santé cellulaire, déterminer la génotoxicité et évaluer les médicaments anticancéreux. La méthode la plus précise pour cela est de mesurer directement la synthèse de l’ADN. La méthode traditionnelle utilise l'analogue nucléoside BrdU (5-bromo-2'-désoxyuridine, un nucléoside analogue de la thymidine), qui est incorporé dans l'ADN nouvellement transcrit. Après incorporation, les échantillons sont traités avec des méthodes agressives (HCl, chaleur ou enzymes) pour dénaturer l’ADN et exposer les molécules de BrdU à la détection par des anticorps anti-BrdU. Cependant, la méthode BrdU pour mesurer la prolifération cellulaire prend du temps et est difficile à réaliser de façon constante. Les traitements sévères nécessaires à cette méthode peuvent nuire à l’intégrité de l’échantillon, à la morphologie cellulaire, à la qualité de l’image et à la capacité de multiplexer.

Le Click-iT™ test Plus EdU mesure le taux de synthèse du nouvel ADN basé sur l’incorporation de l’analogue nucléoside EdU dans l’ADN. La détection est réalisée par une réaction de « clic » catalysée qui se termine généralement en moins de 30 minutes. La réaction de clic utilise des moitiés bioorthogonales (biologiquement uniques) pour marquer fluorescentement les cellules proliférantes, produisant de faibles fonds de fond et des sensibilités de détection élevées. En raison des conditions de réaction douces, les Click-iT™ tests Plus peuvent déterminer avec précision la prolifération cellulaire tout en préservant la morphologie cellulaire, l’intégrité de l’ADN, les sites de liaison antigénique et le signal fluorescent de la GFP. La préservation de l’intégrité de l’ADN permet la coloration de l’ADN, y compris la coloration avec des colorants utilisés pour l’analyse du cycle cellulaire.