Invitrogen™ CellLight™ ER-GFP, BacMam 2.0

Cette construction prête à l’emploi est transfectée dans les cellules à l’aide de la technologie BacMam 2.0 et exprime la GFP fusionnée à la séquence de signal RE de la calréticuline et du KDEL (signal de rétention ER) avec une perturbation cellulaire minimale. On peut observer le comportement de la RE-GFP dans les cellules vivantes grâce à l’imagerie fluorescente et le multiplexage avec d’autres protéines fluorescentes ou des colorants organiques.

Les cellules exprimant CellLight des constructions peuvent aussi être fixées avec du formaldéhyde pour l’imagerie multiplexée à l’aide de techniques immunocytochimiques.

Technologie

CellLight BacMam ER-GFP, BacMam 2.0, est une construction de fusion de la séquence de signaux ER de calréticuline et de KDEL (signal de rétention ER) et d’emGFP, fournissant un ciblage précis et spécifique à la ER-GFP cellulaire. Cette construction de fusion est emballée dans le virus insecte baculovirus, qui ne se réplique pas dans les cellules humaines et est désigné comme sécuritaire à utiliser avec le niveau de biosécurité (BSL) 1 dans la plupart des laboratoires. La technologie BacMam garantit que la plupart des types cellulaires de mammifères sont transdus/transfectés avec une grande efficacité et une toxicité minimale. Cette transfection transitoire peut être détectée après une incubation nocturne pendant jusqu’à cinq jours—, suffisamment pour effectuer la plupart des analyses cellulaires dynamiques. Comme toute technique de transfection/transduction, la méthode BacMam ne transfecte/transduit pas toutes les cellules avec la même efficacité, ce qui la rend peu adaptée aux études de populations cellulaires ou à l’imagerie/comptage automatisée. CellLight Les réactifs sont idéaux pour des expériences nécessitant une co-localisation cellulaire ou subcellulaire, ou pour des études de fonction cellulaire nécessitant une résolution spéciale.

• Rapide et pratique : Il suffit d’ajouter CellLight du réactif aux cellules, de les incuber toute la nuit, puis d’imager—ou de stocker des cellules congelées prêtes à analyser pour une utilisation ultérieure
• Très efficace : jusqu’à 90% de transduction d’une large gamme de lignées cellulaires de mammifères, y compris les cellules primaires, les cellules souches et les neurones
• Flexible : co-transduire plus d’un réactif BacMam pour des expériences multiplexes ou des études de co-localisation; Contrôlez étroitement les niveaux d’expression simplement en variant la dose
• Moins toxique : CellLight les réactifs ne se réplicent pas dans les cellules de mammifères et conviennent à la manipulation du niveau de biosécurité (BSL) 1
• Lignes laser à cytomètre à débit : 488

Analyse cellulaire, structure cellulaire, suivi du traçage & cellulaire, imagerie cellulaire, réticulum endoplasmique (RE), immunocytochimie (ICC), immunofluorescence (IF), traçage des organites