Invitrogen™ MitoTracker™ Colorants pour l’étiquetage des mitochondries

Colorants MitoTracker à base de rosamine pour le marquage des mitochondries

Les sondes MitoTracker permanentes par cellules colorent les mitochondries actives dans les cellules vivantes pour le marquage et la localisation dans l’imagerie des cellules fluorescentes. Nos colorants mitochondriaux à base de rosamine incluent MitoTracker Orange CMTMRos, un dérivé de la tétraméthylrosamine, et MitoTracker Red CMXRos, un dérivé de la X-rosamine. MitoTracker Orange CM-H2TMRos et MitoTracker Red CM-H2XRos sont des versions réduites et non fluorescentes des colorants MitoTracker à base de rosamine qui fluorescissent lors de l’oxydation. Le signal fluorescent des colorants MitoTracker à base de rosamine est retenu dans les mitochondries même après fixation de l’aldéhyde et perméabilisation du détergent, rendant ces colorants flexibles pour de nombreux flux de travail, y compris des applications nécessitant un traitement ultérieur comme l’immunocytochimie ou l’hybridation in situ. MitoTrackerRed et Orange conviennent bien aux expériences de marquage multicolore, car leur fluorescence est bien résolue à partir de la fluorescence verte d’autres sondes.

Colorants MitoTracker à base de carbocyanine pour le marquage des mitochondries

Les colorants MitoTracker permanents par cellules colorent les mitochondries actives dans les cellules vivantes pour le marquage mitochondrial et la localisation dans l’imagerie des cellules fluorescentes. Les colorants à base de carbocyanine MitoTracker Green FM et MitoTracker Red FM s’accumulent dans les mitochondries actives, mais ne sont pas bien conservés dans les mitochondries après fixation aldéhyde. Le MitoTracker Deep FM Red à base de carbocyanine colore les mitochondriaux actifs dans les cellules vivantes et est bien conservé dans les mitochondries après fixation aldéhyde et perméabilisation ultérieure avec des détergents pour des applications nécessitant un traitement ultérieur, comme l’immunocytochimie ou l’hybridation in situ. MitoTracker Red FM et MitoTracker Deep Red FM conviennent bien aux expériences de marquage multicolore, car leur fluorescence rouge est bien résolue à partir de la fluorescence verte d’autres sondes.

Avantages de l’utilisation des colorants de marquage mitochondrial MitoTracker

Les colorants MitoTracker sont fournis dans des fioles de 50 μg de poudre lyophilisée prêtes à être reconstituées. Pour marquer les mitochondries, les cellules vivantes sont simplement incubées avec la sonde MitoTracker de votre choix. Les colorants mitochondriaux diffusent passivement à travers la membrane plasmique et s’accumulent dans les mitochondries actives. Les colorants MitoTracker sont offerts dans une gamme de longueurs d’onde et peuvent être utilisés pour la localisation mitochondriale dans des expériences multicolores.

Les colorations fluorescentes conventionnelles telles que la tétraméthylyrosamine et la rhodamine 123 sont facilement séquestrées par les mitochondries actives et sont réversibles dans les mesures dynamiques du potentiel membranaire, car elles s’échappent facilement des cellules lors de la perte du potentiel membranaire. En revanche, les colorants MitoTracker contiennent une moitié chlorométhyl légèrement réactive au thiol, de sorte que la coloration mitochondriale est conservée si le potentiel de la membrane mitochondriale est perdu, permettant ainsi de conserver de nombreux colorants MitoTracker lors de la fixation cellulaire.

Tout au long du cycle de vie cellulaire, les mitochondries utilisent des substrats oxydables pour produire un gradient électrochimique de protons à travers la membrane mitochondriale (dont le potentiel est négatif), ce qui entraîne ATP la production. Les colorants MitoTracker sont des sondes idéales pour la coloration des mitochondries dans des expériences étudiant le cycle cellulaire ou des processus tels que l’apoptose et d’autres tests de fin de gamme. Les colorants MitoTracker sont aussi disponibles pour les applications de cytométrie en flux (Cat. No M46750, M46751, M46752 et M46753).

Produits apparentés pour le potentiel de la membrane mitochondriale

Pour étudier spécifiquement le potentiel dynamique de la membrane mitochondriale, nous recommandons d’utiliser JC-1 (colorant carbocyanine cationique, Cat). Non. T3168) ou TMRM (ester méthylique de la tétraméthelle rhodamine, Cat. Non. I34361). Le MitoProbe kit d’analyse JC-1 (Cat. Non. M34152) contient le colorant JC-1 en plus du puissant perturbateur de potentiel de membrane mitochondriale, CCCP, qui dépolarise la membrane mitochondriale. Ces réactifs peuvent fournir des contrôles compensatoires pour compenser correctement le rapport fluorescence vert-rouge. La TMRM est utilisée pour la détection de la mesure dynamique du potentiel de la membrane mitochondriale.