Thermo Scientific™ LanthaScreen™ TR-FRET PPAR gamma Kit de liaison compétitif pour test, rabbit

Ce kit contient des anticorps contre la tuberculose du lapin et l’anti-GST; les autres composants du kit sont les mêmes que ceux du kit PV4894 :

Le LanthaScreen™ test de liaison compétitive TR-FRET PPAR GAMMA offre une méthode sensible et robuste pour le criblage à haut débit (HTS) des ligands pour détecter le récepteur gamma activé par proliférateur de peroxysome (gamma PPAR). Le kit utilise un anticorps anti-GST marqué au terbium, un ligand pan-PPAR fluorescent à petite molécule (Fluormone™ Pan-PPAR Green), et un domaine de liaison gamma au ligand PPAR humain (LBD) marqué avec le glutathion S-transférase (GST) dans un format homogène de test mixte.

Pour tester :

Lors de l’exécution du LanthaScreen™ test de liaison compétitive TR-FRET PPAR gamma, Fluormone™ le Pan-PPAR Green est ajouté aux composés de test des ligands, suivi d’un mélange de l’anticorps PPAR gamma-LBD et terbium anti-GST. Lorsque le Fluormone™ Pan-PPAR Green est lié au gamma PPAR, un transfert d’énergie de l’anticorps marqué au terbium vers le traceur se produit, et un rapport TR-FRET élevé est observé. La liaison au ligand compétitif au gamma PPAR est détectée par la capacité d'un composé testé à déplacer le traceur, ce qui entraîne une perte de FRET entre l'anticorps et le traceur. Après une période d’incubation à température ambiante, le rapport TR-FRET de 520 nm/495 nm est calculé et peut être utilisé pour déterminer l’IC50 à partir d’une courbe de réponse à la dose du composé (Figure 1). Ce type d'essai de liaison est analogue aux tests basés sur des radioligands, sauf qu'il élimine la manipulation de la radioactivité et permet un format homogène, « uniquement par addition ».