Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET PPAR delta Kit de liaison compétitif, chèvre

Ce kit contient des anticorps anti-TPS de chèvre; les autres composants du kit sont identiques à ceux du kit A15144 :

Le LanthaScreen™ test de liaison compétitif TR-FRET PPAR delta offre une méthode sensible et robuste pour le criblage à haut débit (HTS) des ligands pour le delta du récepteur activé par proliférateur de peroxysome (delta PPAR). Le kit utilise un anticorps anti-GST marqué au terbium, un ligand pan-PPAR fluorescent de petite molécule (Fluormone™ Pan-PPAR Green), et un domaine de liaison delta au ligand PPAR humain (LBD) marqué avec la glutathion S-transférase (GST), dans un format homogène de test mixte.

Pour
tester : Lors de l’exécution du LanthaScreen™ test de liaison compétitive TR-FRET PPAR delta, Fluormone™ on ajoute du Pan-PPAR Green aux composés testés des ligands, suivi d’un mélange de l’anticorps PPAR delta-LBD et terbium anti-GST. Lorsque le Fluormone™ Pan-PPAR Green est lié au delta du PPAR, un transfert d’énergie de l’anticorps marqué au terbium vers le traceur se produit, et un rapport TR-FRET élevé est observé. La liaison compétitive du ligand au delta du PPAR est détectée par la capacité d’un composé’test à déplacer le traceur, ce qui entraîne une perte de FRET entre l’anticorps et le traceur. Après une période d’incubation à température ambiante, le rapport TR-FRET de 520 nm/495 nm est calculé et peut être utilisé pour déterminer l’IC50 à partir d’une courbe de réponse à la dose du composé (Figure 1). Ce type d’essai de liaison est analogue aux tests basés sur des radioligands, sauf qu’il élimine la manipulation de la radioactivité et permet un format homogène, uniquement par addition.