Thermo Scientific™ LanthaScreen™ TR-FRET PPAR alpha Kit de liaison compétitive de liaison, lapin

Ce kit contient des anticorps contre la tuberculose du lapin et l’anti-GST; les autres composants du kit sont les mêmes que ceux du kit PV4892 :

Le LanthaScreen™ test de liaison compétitive TR-FRET PPAR alpha offre une méthode sensible et robuste pour le dépistage à haut débit (HTS) des ligands pour le récepteur alpha activé par proliférateur de peroxysome (PPAR alpha). Le kit utilise un anticorps anti-GST marqué au terbium, un ligand pan-PPAR fluorescent à petites molécules (Fluormone™ Pan-PPAR Green), et un domaine de liaison au ligand alpha PPAR humain (LBD) marqué avec la glutathion S-transférase (GST), dans un format homogène de test mixte.

Pour tester :

Lors de l’exécution du LanthaScreen™ test de liaison compétitive TR-FRET PPAR alpha, Fluormone™ le Pan-PPAR Green est ajouté aux composés de test du ligand, suivi d’un mélange de l’anticorps anti-GST du PPAR alpha-LBD et du terbium. Lorsque le Fluormone™ Pan-PPAR Green est lié à PPAR alpha, un transfert d’énergie de l’anticorps marqué au terbium vers le traceur se produit, et un rapport TR-FRET élevé est observé. La liaison compétitive du ligand à PPAR alpha est détectée par la capacité d'un composé testé à déplacer le traceur, ce qui entraîne une perte de FRET entre l'anticorps et le traceur. Après une période d’incubation à température ambiante, le rapport TR-FRET de 520/495 nm est calculé et peut être utilisé pour déterminer l’IC50 à partir d’une courbe de réponse à la dose du composé (Figure 1). Ce type d'essai de liaison est analogue aux tests basés sur des radioligands, sauf qu'il élimine la manipulation de la radioactivité et permet un format homogène « à addition seulement ».