Invitrogen™ Vecteur d’expression des mammifères pcDNA™4/TO

• Utilise un mécanisme de répresseur qui bloque la transcription du puissant promoteur CMV en l’absence de tétracycline
• Comme les éléments du système T-REx n’utilisent pas de transactivateurs viraux, l’utilisateur peut obtenir une expression de haut niveau à partir d’un promoteur CMV complet sans activation secondaire et non spécifique des gènes de l’hôte
• Deux séquences opératrices de tétracycline (_{TetO 2}) ont été insérées entre la boîte TATA du promoteur CMV et le site de départ transcriptionnel : La séquence_{TetO 2} elle-même n’a aucun effet sur l’expression. Lorsque la protéine répressrice de tétracycline (TR) est présente, elle lie effectivement les sites_{TetO 2} et bloque l’initiation de la transcription
• La tétracycline ajoutée au milieu de culture se lie à la protéine TR et modifie sa conformation
• Ce changement fait que la protéine TR libère des sites_{TetO 2} , réprimant la transcription du promoteur CMV pour une expression de haut niveau du gène d’intérêt
• Les niveaux d’expression peuvent être modulés en fonction de la concentration de tétracycline et peuvent être induits jusqu’à des niveaux atteints avec des vecteurs d’expression constitutifs CMV
• Zeocin ou gène de résistance à l’hygromycine pour une sélection efficace de lignées cellulaires stables de mammifères
• Grand site de clonage multiple pour simplifier le clonage

Expression des mammifères, expression des protéines, protéines, expression, isolement et analyse, expression régulée, intégration ciblée