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Invitrogen™ Champion™ Kit d’expression directionnelle TOPO™ pET102 avec BL21 Star™ (DE3) E Shot™. coli chimiquement compétent

Numéro de catalogue. K10201
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Numéro de catalogue. K10201 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur K10201

Comprend

200 ng de vecteur pET Champion linéarisé activé par topoisomerase I; de l’eau stérile; dNTP; Tampon PCR 10X; solution saline; gabarit de commande et amorces; des amorces pour le séquençage ou le dépistage PCR; et un contrôle d’expression. La TOP10 boîte contient 21 aliquotes de 50 μL d’E. coli chimiquement compétent, un milieu S.O.C. et un plasmide témoin. La boîte BL21 Star(DE3) contient 21 aliquotes de 50 μL d’E. coli chimiquement compétentes, un milieu S.O.C. et un plasmide témoin.

La protéine d’intérêt peut atteindre des niveaux supérieurs à 50% de la protéine cellulaire totale dans E. coli pendant l’expression

  • Basée sur des vecteurs d’expression T7 initialement développés par Studier et ses collègues, l’expression de haut niveau est atteinte parce que l’ARN polymérase T7 est plus processive que l’ARN polymérase native d’E. coliet est dédiée à la transcription du gène d’intérêt
  • La production de protéines est encore améliorée dans le système par la souche BL21 Stard’expression E. coli, qui améliore significativement la stabilité des transcriptes d’ARNm et augmente l’expression des protéines jusqu’à dix fois
  • Un clonage directionnel TOPO simplifié et efficace permet d’entrer rapidement dans le vecteur d’expression ChampionpET
  • Présente des vecteurs d’expression ChampionpET linéarisés, activés par topoïsomerase I, pour un clonage directionnel de cinq minutes
  • La technologie de clonage directionnel TOPO facilite l’expression génique parce que l’enzyme de relecture est utilisée pour la PCR, ce qui réduit les erreurs dans les gènes clonés
  • Plus de 90% des clones sont dans la bonne orientation pour l’expression génique, ce qui réduit le temps passé au criblage des colonies
  • Chaque vecteur porte un promoteur T7lac pour une expression de haut niveau

Expression bactérienne/expression des protéines/protéines, expression, isolement et analyse

Spécifications

Système constitutif ou inductible Inductible
Agent inducteur IPTG
Promoteur T7, lacO
Type de produit TOPO Kit d’expression
Agent de sélection (Eucaryote) Aucun
Contenu et stockage Chaque Champion™ kit d’expression directionnelle TOPO™ pET est fourni comme un système d’expression complet. La boîte d’expression directionnelle TOPO™ contient 200 ng de vecteur pET linéarisé Champion™ activé par l’I topoisomerase; eau stérile; dNTP; Tampon PCR 10X; solution saline; gabarit de commande et amorces; des amorces pour le séquençage ou le dépistage PCR; et un contrôle d’expression. Conserver à -20 °C. La boîte One Shot™ TOP10 contient vingt et un aliquotes de 50-l μ d’E. coli chimiquement compétentes, un milieu S.O.C. et un plasmide témoin. Conserver à -80 °C. La boîte One Shot™ BL21 Star™(DE3) contient vingt et un aliquotes 50-l μ d’E. coli chimiquement compétentes, un milieu S.O.C. et un plasmide témoin. Conserver à -80 °C. Les kits avec Lumio™ technologie contiennent 20 μl de réactif Lumio™ de détection. Conserver à -20 °C. Stabilité garantie pendant 6 mois lorsqu’il est conservé dans de bonnes conditions.
Résistance aux antibiotiques bactérienne Ampicilline (AmpR)
Souche bactérienne/de levure BL21 Étoile™ (DE3)
Clivage Site de reconnaissance EK (Enterokinase)
Système d’expression E. coli
Mécanisme d’expression Expression cellulaire
Étiquette de la protéine Son tag (6x), Étiquette épitope V5, Thioredoxine
Méthode de clonage Directionnel TOPO
Quantité 20 réactions
Vector pET
Gamme de produit One Shot (Un seul coup)
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.