Invitrogen™ Image-iT™ Kit d’absorption des lipoprotéines à faible densité, pHrodo™ rouge

Le kit a été conçu spécifiquement pour détecter la liaison et l’absorption du LDL via la voie d’internalisation des récepteurs LDL, permettant un contrôle et une flexibilité maximaux dans la conception expérimentale. Elle peut être utilisée avec la microscopie à fluorescence, la cytométrie en flux, le tri cellulaire, l’analyse à haut débit et l’analyse à fort contenu.

• pHrodo Le Red-LDL est détectable avec un ensemble de filtres RFP/TRITC (pic d’absorption : ∼560 nm, pic d’émission : ∼585 nm). •
pHrodo Le Red-LDL est multiplexable avec des colorants d’émission verts, rouge profond, violet et bleu, tels que GFP, DAPI, Hoechst HCS LipidTOX et LysoTracker le protocole Deep•
Red No-wash est possible, permettant une mesure dynamique de l’absorption et du trafic

pHrodo de LDL. Le rouge-LDL est faiblement fluorescent à pH neutre à l’extérieur des cellules, mais fluoresce vivement après l’endocytose. Cette caractéristique permet un protocole sans lavage lors de l’utilisation pHrodo de Red-LDL, permettant une mesure cinétique de l’absorption du LDL, de la maturation endosomale et du trafic cellulaire.

Deux commandes sont incluses dans le kit : le LDL non marqué comme prétraitement optionnel pour occulter les récepteurs de surface cellulaire avant de sonder avec la structure marquée, et l’héparine qui chélate le LDL en phase de solution à l’extérieur des cellules, empêchant la liaison et l’absorption. Lorsque les cellules sont marquées en l’absence de ces contrôles de prétraitement, un signal fluorescent indique une endocytose spécifique médiée par les récepteurs LDL.