Invitrogen™ Fluo-4, AM, cellule permanente

Les indicateurs de calcium marqués sont des molécules qui présentent une augmentation de la fluorescence lors de la liaison à Ca²⁺. Fluo-3 a été utilisé pour imager la dynamique spatiale de la signalisation Ca²⁺ , dans des expériences de cytométrie en flux impliquant la photoactivation de chélateurs en cage, de seconds messagers et de neurotransmetteurs, ainsi que pour le dépistage pharmacologique cellulaire. Fluo-4 est un analogue de fluo-3 avec les deux substituants chlorés remplacés par des fluors, ce qui entraîne une excitation de fluorescence accrue à 488 nm et donc des niveaux de signal de fluorescence plus élevés. Les cellules peuvent être chargées des formes ester AM de ces indicateurs calciques en ajoutant l’indicateur dissous directement dans des plats contenant des cellules cultivées. Ces indicateurs sont utiles pour la microscopie à fluorescence et confocale, la cytométrie en flux et les applications de criblage de microplaques.

Spécifications de l’indicateur de calcium (ester du matin) :

• Étiquette (Ex/Em de la forme^{Ca 2+}–reliée) : Fluo-4 (494/506 nm)
• Augmentation de l’intensité de fluorescence lors de la liaison Ca²⁺ : >100 fois
• K_d pour Ca²⁺ en tampon : ∼335 nM
• Présentent une augmentation de fluorescence lors de la liaison Ca²⁺ avec un léger décalage de longueur d’onde

Utilisation du TPEN pour contrôler les cations de métaux lourds

De plus, des indicateurs basés sur BAPTA comme ceux-ci lient divers cations de métaux lourds (par exemple, Mn²⁺, Zn²⁺, Pb²⁺) avec une affinité nettement plus élevée que Ca²⁺. Les perturbations des mesures de calcium causées par la présence de ces ions peuvent être contrôlées à l’aide du TPEN chélateur sélectif pour les métaux lourds (Cat. No T1210).

Plus de choix pour les indicateurs fluorescents du calcium

Nous offrons une large sélection d’indicateurs Molecular Probes™ de calcium à utiliser dans divers scénarios expérimentaux. Pour plus d’informations, consultez la section 19.3 sur les indicateurs fluorescents Ca²⁺ excités par la lumière—visible dans le Molecular Probes™ Manuel.

Pour^{les indicateurs Ca} 2+ excitables par UV, les indicateurs Ca 2⁺ à base de protéines, les conjugués des indicateurs Ca²⁺ , et pour les indicateurs à fluorescence d’autres ions métalliques (c.-à-d. Mg²⁺, Zn²⁺), revoir les indicateurs pour Ca²⁺, Mg²⁺, Zn²⁺ et autres ions—métalliques du Chapitre 19 du Molecular Probes™ Manuel.

À l’état réduit, les maxima d’excitation et d’émission de l’acide BODIPY™ undécanoïque 581/591 sont de 581/591 nm; après oxydation, la sonde déplace l’excitation et l’émission à 488/510 nm.

Nous recommandons de dissoudre dans du DMSO anhydre de haute qualité pour des concentrations de stock de 1 à 5 mM.