Invitrogen™ Dynabeads™ Streptavidine pour la transcription in vitro

Les caractéristiques de la Dynabeads streptavidine pour la transcription in vitro incluent :

• Flexibilité – pour choisir un modèle ADN avec IVT flexibilité de conception et d’amplification
• Efficacité – : réutiliser le gabarit d’ADN et les billes au moins six fois pour aider à réduire les coûts et éliminer/minimiser le temps de préparation pratique des plasmides ainsi que le risque de transfert d’ADN bactérien de l’hôte
• Alternance de la scalabilité – entre flux de travail manuels et automatisés pour correspondre à l’échelle requise (microgrammes à grammes d’ARNm) et au débit
• La qualité – aide à garantir un approvisionnement sûr et flexible en billes magnétiques pour naviguer de la recherche sur la découverte de médicaments à base d’ARN à la fabrication commerciale avec des solutions équivalentes (disponibles via l’alimentation OEM) sans encourir de temps ou de coûts supplémentaires liés au changement de technologie ou de matière première

Aperçu du flux de travail
Un modèle biotinylé est réalisé par amplification PCR de la séquence cible dans une construction plasmidique ou dans une construction d’ADN synthétique à l’aide d’une amorce avant biotinylée et d’une amorce inverse non biotinylée. En alternative à l'amplification par PCR, un plasmide linéarisé peut être biotinylé par une réaction de remplissage de biotine-dUTP dans la séquence de surplomb 5', à condition que le design plasmidique soit correct. Le modèle biotinylé est ensuite immobilisé directement en Dynabeads Streptavidine pour les billes de transcription in vitro sans avoir besoin de purification préalable. Le gabarit lié aux billes est utilisé directement dans le IVT, puis retiré de l’ARNm synthétisé par séparation magnétique (Figure 1). Le modèle peut être réutilisé (au moins six fois) lors de réactions consécutives IVT (figure ci-dessous).

La phase IVT solide est compatible avec les réactifs couramment utilisés tels que le kit de transcription MEGAscript T7, le kit de transcription mMESSAGE mMACHINE T7 et le kit de transcription mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA, selon vos besoins et stratégies pour le capping et la polyadénylation.

Les perles sont offertes ici comme un produit autonome. Ils sont également inclus dans le Dynabeads kit de transcription in vitro et de purification de l’ARN.

Prêts pour l’automatisation avec les systèmes
de purification KingFisher Les billes magnétiques de 1 μm sont idéaux pour le criblage à haut débit. Le processus peut être automatisé à l’aide de manipulateurs de liquides ou de l’un de nos systèmes de purification d’échantillons KingFisher. Les scripts pour les flux de travail automatisés de purification KingFisher Flex et KingFisher Apex sont disponibles sur notre site web.

Approvisionnement
commercial Pour en savoir plus sur les produits équivalents et la documentation de soutien disponible pour la fabrication conforme aux GMP de vaccins et de traitements à ARNm, visitez : thermofisher.com/dynabeadsmrna