Invitrogen™ Solution de transition tissulaire gelée à l’ARNet ICE™

RNAlater-ICE est un réactif novateur pour la transition des tissus gelés vers un état facilement traité pour l’extraction d’ARN de haute qualité. Les tissus congelés sont simplement immergés dans l’ARN-plus tard-ICE et laissés décongeler toute la nuit à -20 °C. Une fois décongelés, les tissus peuvent être traités comme des tissus frais selon les procédures standard d’isolement de l’ARN. Plus de broyage laborieux des tissus gelés pour protéger l’ARN.

• Traiter les tissus précédemment congelés comme les échantillons fraîchement prélevés
• Décongeler les tissus dans l’ARN Un plus tard-ICE protège l’ARN de la dégradation Plus
• de pulvérisation tissulaire avec mortier et pilon ni transfert maladroit de poudre vers un tube•
Répartition facile des échantillons de tissus congelés pour plusieurs expériences Congélation rapide des tissus Préserve l’ARN

Souvent, les tissus qui doivent être stockés avant l’isolement de l’ARN sont “brusquement” ou flash” “
• congelés sur de la glace sèche ou dans de l’azote liquide pour préserver l’intégrité de l’ARN. L’ARN dans les tissus est stable lorsqu’il est congelé à -80 °C, mais le dégel du tissu avant ou pendant sa perturbation peut entraîner une dégradation de l’ARN. C’est vrai même si le tissu dégèle pendant la solution de dénaturation.

Le traitement des tissus congelés est problématique
Les tissus congelés sont généralement broyés avec un mortier et un pilon refroidis afin de maintenir la qualité de l’ARN. De l’azote liquide doit être ajouté au mortier pour garder l’échantillon congelé pendant qu’il est broyé. Pour plusieurs échantillons, ce processus est laborieux. Soit un ensemble de mortier et pilon séparé est nécessaire pour chaque échantillon, soit l’ensemble doit être décongelé et nettoyé après chaque traitement pour éviter toute contamination croisée. Le tissu en poudre peut aussi dégeler lors du transfert vers un récipient d’homogénéisation. Cela entraîne souvent la formation d’amas qui ne se dispersent pas facilement dans la solution de lyse, entraînant une dégradation et une perte d’ARN. Les très petits échantillons doivent être homogénéisés immédiatement dans la solution de lyse, ce qui peut encore être encombrant s’il y a plusieurs échantillons à traiter.

Traiter les tissus congelés sans compromettre l’intégrité
de l’ARN ARN-plus tard-ICE résout tous ces problèmes. Il suffit d’immerger des échantillons de tissus congelés dans 10 volumes d’ARN-Later-ICE et de les conserver toute la nuit à -20 °C (la solution restera liquide à ces températures). À mesure que le tissu dégèle, l’intégrité de l’ARN est protégée. Une fois traité, le tissu peut être stocké en toute sécurité à 4 °C ou même à température ambiante (pendant une période limitée) et peut être disséqué ou traité avant l’homogénéisation dans un tampon standard d’isolation de lyse ARN. Ainsi, le même échantillon de tissu congelé peut être utilisé plusieurs fois pour différentes expériences sans compromettre l’intégrité de l’ARN.