Invitrogen™ Dynabeads™ Oligo(dT)₂₅

Dynabeads™ Les billes d’isolation d’ARNm Oligo(dT₎₂₅ ciblent spécifiquement et capturent les molécules d’ARNm de pratiquement n’importe quel échantillon brut et éliminent le besoin de purifier l’ARN total lorsque l’acide nucléique contenant l’information désirée est l’ARNm. Puisque l’ARNm ne comprend qu’environ 1,5 –% de l’ARN cellulaire total, l’isolement de l’ARN total n’est pas la méthode la plus efficace pour isoler l’ARNm. D’autres technologies conçues pour purifier l’ARN total produisent ∼80% d’ARN ribosomique et forcent l’ARNm à rivaliser avec l’ARN ribosomal, l’ARN de transfert, le microARN, le petit ARN nucléolaire et le petit ARN cytoplasmique pour la liaison membranaire. Avantages des Dynabeads™ billes Oligo(dT)₂₅ :

• Une procédure rapide et douce permet d’obtenir un ARNm
• pur et intact. Isolation d’ARNm extrêmement pure, meilleur choix en amont de la synthèse•
d’ADNc. L’isolation d’ARNm extrêmement sensible permet la synthèse d’ADNc et la construction d’une bibliothèque d’ADNc à partir d’échantillons de départ ultra-petits (permet la construction d’une bibliothèque d’ADNc à partir d’une seule cellule).

Comment fonctionnent
les billes L’oligo(dT)_25-revêtuDynabeads™ cibler et capturer spécifiquement le transcriptome d’ARNm à partir d’une très grande variété d’échantillons de départ bruts. L’ARN ribosomique, l’ADN, les protéines et les petites molécules d’ARN (comme l’ARN de transfert, le microARN et le petit ARN nucléolaire) ne se lient pas aux billes et sont rejetés. Seules les espèces d’ARN polyadénylées (ARNm) sont capturées. L’ARNm isolé est pur, éliminant le besoin de soustraction de l’ARN ribosomique ou d’un traitement par DNase post-extraction. Ce système sans colonnes assure la meilleure récupération du transcriptome :

• Capture physique d’ARNm sur des
• billes magnétiques mobiles Procédures•
de manipulation magnétique rapides et douces Aucun ARNm perdu lors de spins
• à forte force g Aucun ARNm piégé dans les membranes de colonne lors del’élution

Applications
L’ARNm convient à toutes les applications moléculaires en aval, y compris le clonage génique, la synthèse d’ADNc, la construction de bibliothèque d’ADNc, la RT-PCR, le RT-PCR quantitatif, le RPA (test de protection sur la ribonucléase), l’hybridation soustractive, l’extension d’amorce, SAGE, RACE, et d’autres. Les Dynabeads™ billes d’isolation d’ARNm Oligo(dT₎₂₅ sont la méthode idéale de purification de l’ARNm avant la construction de la bibliothèque d’ADNc. L’utilisation de ces billes assure la meilleure récupération et enrichissement du transcriptome. Ces billes capturent plus de transcriptome que ce qui est possible avec des méthodes qui intègrent une étape d’isolation totale de l’ARN en amont de l’isolation de l’ARNm.

Options
d’élution de véracitéL’élution peut être effectuée dans n’importe quel volume jusqu’à 5 μL. L’élution de l’ARNm est optionnelle car les réactions enzymatiques dans les procédures en aval ne sont pas inhibées par la présence de Dynabeads™. De plus, on peut effectuer une synthèse d’ADNc directement sur les billes pour créer une bibliothèque d’ADNc en phase solide réutilisable.