Molecular Probes™ Kit de sonde d’asymétrie à membrane ratiométrique violette/kit d’apoptose des cellules mortes, pour la cytométrie en flux

Le kit Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis offre une méthode simple et rapide pour la détection de l’apoptose par discrimination des cellules mortes par cytométrie en flux. La sonde d'asymétrie à membrane ratiométrique violette, 4'-N,N-diéthylamino-6-(N,N,N-dodécyl-méthylamino-sulfopropyl)-méthyl-3-hydroxyflavone (F2N12S), est un nouveau colorant excitable violet pour la détection des changements d'asymétrie membranaire lors de l'apoptose. Le colorant présente une réaction de transfert de protons intramoléculaire à l’état excité (ESIPT) résultant en une fluorescence double avec deux bandes d’émission correspondant à 530 nm et 585 nm, produisant une réponse ratiométrique à deux couleurs aux variations de charge de surface. Les sondes ratiométriques présentent plusieurs avantages par rapport aux réactifs traditionnels marqués au fluorochrome. La sonde ratiométrique est un paramètre absolu auto-calibrant de la transformation apoptotique, indépendant de la concentration de la sonde, de la taille de la cellule et des variations de l’instrument, telles que les fluctuations de l’intensité du laser ou la sensibilité des détecteurs. Étant donné que l’apoptose modifie la charge de surface de la foliole externe de la membrane plasmique, la sonde d’asymétrie à membrane violette F2N12S peut surveiller les changements d’asymétrie membranaire survenus pendant l’apoptose par un changement de l’intensité relative des deux bandes d’émission du colorant. La sonde F2N12S est combinée avec la coloration des cellules mortes SYTOX(R AADvanced ), qui ne peut traverser la membrane cellulaire que dans les cellules apoptotiques tardives ou nécrotiques, permettant la discrimination des cellules apoptotiques précoces. Les échantillons peuvent être analysés après une incubation de 5 minutes à température ambiante et ne nécessitent pas de tampons spéciaux ni d’étapes de lavage. Ce kit peut être jumelé à d’autres réactifs tels que MitoProbe™ DiIC1(5) ou annexin V pour l’analyse multiparamétrique de l’apoptose et de la viabilité. Ce kit de réactifs permet aux chercheurs de maximiser l’utilité de leurs instruments en utilisant le laser violet. Chaque kit contient suffisamment de réactifs pour 100 ∼tests de cytométrie en flux.

Consultez un guide de sélection pour tous les tests d’apoptose pour la cytométrie en flux.