Thermo Scientific™ ViewRNA™ Test de criblage HC

Les caractéristiques des ViewRNA tests tissulaires incluent :

• Détecter jusqu’à quatre cibles d’ARN à un seul niveau de transcription dans les cellules de culture cellulaire dans un format automatisé pour des plaques à 96 ou 384 puits
• Utilisez des 488, Alexa Fluor 546, Alexa Fluor 947 et/ou Alexa Fluor 750 brillants Alexa Fluor
• Double détection avec protéines possible en optimisant les conditions expérimentales

L’essai ViewRNA est une nouvelle solution d’hybridation in situ à ARN, basée sur la conception d’un ensemble de sondes brevetée et une technologie propriétaire d’amplification du signal. ViewRNA Les tests offrent une sensibilité à l’ARN en copie unique dans des cellules individuelles sous forme de test multiplex. L’amplification du signal repose sur une hybridation spécifique des oligonucléotides adjacents du jeu de sondes vers un ARN cible, ce qui donne d’excellents rapports signal/bruit. Des systèmes d’amplification du signal indépendants mais compatibles permettent la détection simultanée de jusqu’à quatre ARN cibles dans un seul test.

Le ViewRNA test de criblage HC est composé de trois modules (chacun vendu séparément) :

• ViewRNA Trousse de dépistage HC
• ViewRNA Kit d’amplification du signal d’écran HC
• ViewRNA Ensembles de sondes. Les sondes peuvent être commandées à partir de https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cellular-imaging/in-situ-hybridization-ish/rna-fish/viewrna-cell-assays.html

Comment ça fonctionne

Étape 1 : Préparez l’échantillon. Les cellules adhérentes sur une surface solide sont fixes et perméabilisées. On peut effectuer la détection des protéines en suivant le protocole d’immunocytochimie.

Étape 2 : Hybridez les ensembles de sondes. Les ensembles de sondes spécifiques à gènes s’hybrident pour cibler les ARNm.

Étape 3 : Amplifier le signal. Des systèmes d’amplification du signal indépendants mais compatibles permettent la détection simultanée de plusieurs ARN dans un seul essai. Des ensembles distincts de molécules de préamp, d’amp et de sonde de marque sont utilisés pour détecter différents ARN cibles.

Étape 4 : Image. Les ARNm cibles sont visualisés à l’aide de systèmes d’imagerie à haut contenu ou d’un microscope à épifluorescence standard.

Composants des ViewRNA kits de dépistage HC.

Stockez les composants suivants à 2 °C à 8 °C

• Pretease QS : Enzyme en solution tamponnée aqueuse
• Diluant de l’ensemble de sonde QS : Solution aqueuse contenant de la formamide et du détergent
• Diluant amplificateur QS Solution aqueuse contenant de la formamide et du détergent
• Sonde d’étiquette Diluant QS Solution aqueuse contenant un détergent

Conservez les composants suivants à température ambiante.

• Tampon d’arrêt de protéase Solution tampon aqueuse
• Tampon de stockage Solution tampon aqueuse tampon
• Solution détergente : Solution tampon aqueuse contenant un détergent
• Composante tampon de lavage 1 (Comp de lavage 1) : Solution aqueuse contenant un détergent
• Composant tampon de lavage 2 (comp de lavage 2) : Solution tampon aqueuse
• Tampon pré-hybridation (tampon préHyb) : Solution tampon aqueuse

Composants des kits d’amplification ViewRNA du signal d’écran HC :

Stockez les composants suivants à -20 °C.

• Préamplificateur (Préampli types 4, 6, 8 ou 10) : ADN en solution tampon aqueuse.
• Amplificateur (ampères types 4, 6, 8 ou 10) : ADN en solution tampon aqueuse.
• Label Probe (LP type 4-Alexa Fluor 488, LP type 1-Alexa Fluor 546, LP type 6-Alexa Fluor 647, LP type 10-Alexa Fluor 750) : Oligonucléotides conjugués à un colorant fluorescent en solution tampon aqueuse.

Remarque :

• Les kits 1-plex ne contiennent que des réactifs de type 1
• Les kits 2-plex contiennent des réactifs de type 1 et 6
• Les kits 3-plex contiennent des réactifs de type 1, 4 et 6
• Les kits 4-plex contiennent des réactifs de type 1, 4, 6 et 10