Invitrogen™ Oligonucléotides de transcription inverse à commutation de gabarit

L’oligonucléotide à commutation de gabarit (TSO) et l’amorce de capture Oligo (dT) sont conçus pour être utilisés dans la réaction de transcription inverse par commutation de gabarit. La capture de séquences contenant des oligonucléotides contenant de l’oligo(dT) et de l’adaptateur sert d’amorce pour la synthèse sélective de l’ADN du premier brin à partir d’ARN contenant du poly(A). Lorsque la transcriptase inverse atteint l’extrémité 5ʹ du modèle d’ARN, l’activité terminale de la désoxynucléotyltransférase (TdT) de la transcriptase inverse ajoute 13 –nucléotides supplémentaires à l’extrémité de l’ADNc, permettant l’hybridation de l’oligo de commutation du modèle et l’incorporation sans ligature de la séquence adaptatrice à l’extrémité 3ʹ de l’ADNc résultant. Les deux oligos sont fournis sous forme de solutions concentrées prêtes à l’emploi. Pour une efficacité maximale de commutation de modèles, nous recommandons d’utiliser l’amorce Template Switching Oligo and Capturing oligo (dT) avec Invitrogen SuperScript IV Template Switching RT Master Mix.

Les séquences adaptatrices incorporées aux deux extrémités de l’ADNc peuvent servir de sites de liaison d’amorce lors de l’étape suivante d’amplification PCR, permettant la préamplification globale de modèles de longueur complète. Pour la PCR, utilisez l’amorce de préamplification, qui est complémentaire à la séquence d’adaptateurs TSO et de capture Oligo (dT) et est fourni sous forme de solution concentrée prête à l’emploi, 100X.

Les amorces TSO, Capturing Oligo (dT) et Preamplification sont également disponibles dans le kit complet Invitrogen SuperScript IV Single Cell/Low Input cDNA PreAmp Kit (Cat. Non. 11752048).

Applications
Synthèse
• de l’ADNc, préamplification
• de l’ADNc, RNA-seq
• RACE •