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Thermo Scientific™ Pierce™ Kit de Western Blot à S-nitrosylation et tampon HENS
Description
Le kit Pierce S-Nitrosylation Western Blot fournit un tampon de lyse/réaction cellulaire, un agent bloqueur sulfhydryl-réactif, un agent réducteur, un agent de marquage et un anticorps anti-TMT pour marquer 40 échantillons (100 μg chacun). Comme pour les tests traditionnels à commutation de S-nitrosylation, les cystéines non modifiées sont bloquées par un composé sulfhydryl-réactif. Les cystéines s-nitrosylées sont réduites sélectivement avec de l’ascorbate dans le tampon HENS pour être marquées par iodoTMTzero des réactifs, qui se lient irréversiblement à la cystéine thiol qui était S-nitrosylée. La détection des protéines modifiées par réactif est facilitée à l’aide d’un TMT anticorps anti-TMT.
La S-nitrosylation est une modification post-traductionnelle qui régule de nombreux processus, notamment la prolifération cellulaire, l’apoptose, la relaxation du muscle lisse, la libération de neurotransmetteurs et la différenciation. Lors de la S-nitrosylation, les radicaux d’oxyde nitrique réagissent avec les thiols de cystéine pour produire un adduct de S-NO qui modifie l’activité des protéines.
Pierce S-Nitrosylation Western Blot
Le Pierce S-Nitrosylation Western Blot fournit les réactifs nécessaires pour réaliser une version modifiée du test traditionnel de commutation S-nitrosylation, incluant un réactif bloquant la cystéine, un agent réducteur, un tampon de réaction, iodoTMT un réactif de marquage et un anticorps anti-TMT. Le marquage est réalisé à l’aide d’un réactif non biologique iodoTMT au lieu de la HPDP-biotine, réduisant ainsi le signal de fond lors de la détection de western blot. En plus de la détection des protéines S-nitrosylées par western blot, une résine anti-TMT immobilisée peut être utilisée pour enrichir sélectivement des protéines/peptides S-nitrosylés marqués avec iodoTMT des réactifs. Ce flux de travail permet la cartographie des sites de S-nitrosylation et la quantification multiplexée à l’aide de la spectrométrie de masse.
Les caractéristiques du kit Western Blot à S-nitrosylation Pierce incluent :
• Des réactions de marquage optimisées spécifiques—permettent de remplacer les modifications post-translationnelles de la S-nitrosocystéine par iodoTMT un réactif pour une détection facile par western blot à l’aide d’anticorps
• anti-TMT . Un meilleur rapport signal/bruit—utilise un réactif non biologique iodoTMT pour le marquage au lieu de l’HPDP-biotine, ce qui réduit le fond de fond lors de la détection
• du western blot. Compatible— avec le flux de travailLa méthode de marquage est compatible avec d’autres méthodes d’analyse, incluant l’enrichissement par résine anti-TMT et la quantification multiplex par spectrométrie
• de masse. Tous les réactifs nécessaires pratiques—incluent un kit
HENS Buffer
HENS Buffer composé de 100 mM HEPES (pH 7,8), 1 mM d’EDTA, 0,1 mM de Neocuproine et 1% de SDS. Il s’agit d’un tampon de lyse cellulaire destiné à être utilisé avec le kit Western Blot Pierce S-Nitrosylation, qui permet la détection sensible des modifications post-traductionnelles de la protéine S-nitrosocystéine dans un kit complet et facile à utiliser.
Pierce S-Nitrosylation Western Blot
Le Pierce S-Nitrosylation Western Blot fournit les réactifs nécessaires pour réaliser une version modifiée du test traditionnel de commutation S-nitrosylation, incluant un réactif bloquant la cystéine, un agent réducteur, un tampon de réaction, iodoTMT un réactif de marquage et un anticorps anti-TMT. Le marquage est réalisé à l’aide d’un réactif non biologique iodoTMT au lieu de la HPDP-biotine, réduisant ainsi le signal de fond lors de la détection de western blot. En plus de la détection des protéines S-nitrosylées par western blot, une résine anti-TMT immobilisée peut être utilisée pour enrichir sélectivement des protéines/peptides S-nitrosylés marqués avec iodoTMT des réactifs. Ce flux de travail permet la cartographie des sites de S-nitrosylation et la quantification multiplexée à l’aide de la spectrométrie de masse.
Les caractéristiques du kit Western Blot à S-nitrosylation Pierce incluent :
• Des réactions de marquage optimisées spécifiques—permettent de remplacer les modifications post-translationnelles de la S-nitrosocystéine par iodoTMT un réactif pour une détection facile par western blot à l’aide d’anticorps
• anti-TMT . Un meilleur rapport signal/bruit—utilise un réactif non biologique iodoTMT pour le marquage au lieu de l’HPDP-biotine, ce qui réduit le fond de fond lors de la détection
• du western blot. Compatible— avec le flux de travailLa méthode de marquage est compatible avec d’autres méthodes d’analyse, incluant l’enrichissement par résine anti-TMT et la quantification multiplex par spectrométrie
• de masse. Tous les réactifs nécessaires pratiques—incluent un kit
HENS Buffer
HENS Buffer composé de 100 mM HEPES (pH 7,8), 1 mM d’EDTA, 0,1 mM de Neocuproine et 1% de SDS. Il s’agit d’un tampon de lyse cellulaire destiné à être utilisé avec le kit Western Blot Pierce S-Nitrosylation, qui permet la détection sensible des modifications post-traductionnelles de la protéine S-nitrosocystéine dans un kit complet et facile à utiliser.
Spécifications
Spécifications
| Type de produit | Tampon HENS |
| Méthode de détection | S-Nitrosylation |
| Gamme de produit | Pierce |
| Quantité | 100 mL |
| Réactivité | Toutes les espèces |
| Contenu et stockage | Le tampon HENS est stocké à température ambiante et expédié à température ambiante. |