Thermo Scientific™ Pierce™ Coomassie Colorants bleus brillants

Coomassie Les colorants R-250 et G-250 sont deux formes chimiques d’un composé de triphénylméthane disulfuré couramment utilisé comme base de colorations pour la détection de protéines dans l’électrophorèse en gel et des réactifs de type Bradford pour la quantification des protéines. La forme R-250 (teintée de rouge) ne comporte pas deux groupes méthyle présents dans la forme G-250 (teintée de vert), également appelée colorant coomassie colloïdal.

Typiquement, les colorations en gel de Coomassie et les réactifs de test protéique sont formulés sous forme de solutions très acides dans 25 à 50% de méthanol. Dans des conditions acides, le colorant se lie aux protéines principalement par l’intermédiaire d’acides aminés basiques (principalement de l’arginine, de la lysine et de l’histidine), et le nombre de ligands de colorant Coomassie liés à chaque molécule protéique est approximativement proportionnel au nombre de charges positives présentes sur la protéine. La liaison aux protéines fait passer le colorant du brun rougeâtre au bleu vif (le maximum d’absorption est de 595 nm).

Les caractéristiques incluent :
• Une détection—facile développe des complexes intensément colorés avec des protéines. Une
• haute sensibilité—peut déterminer aussi peu que 0,5 μg/cm2 de protéines présentes dans une matrice
• de gel. L’anion de coloration—réversible du Coomassie colorant Brilliant Blue formé dans le milieu de coloration acide se combine avec les groupes aminos protonés des protéines par interaction électrostatique; le complexe résultant est réversible dans des conditions
• appropriéesLa différenciation entre le colorant lié et nonlié lorsqu’il est dissous dans un tampon de citrate de 0,01 M au pH 3,0, a un maximum d’absorption à 555 nm; le complexe protéine-colorant se caractérise par un pic légèrement plus large que celui du colorant libre, avec un maximum à 549 nm —