Invitrogen™ Équipement TOP10F' Electrocomp™

TOP10F´ Electrocomp Les cellules Kit E. coli sont identiques aux TOP10 cellules, avec l’ajout d’un épisome F´ . L’épisome F´ porte le gène de résistance à la tétracycline et permet d’isoler l’ADN simple brin (ssDNA) à partir de vecteurs ayant une origine de réplication f1. De plus, l’épisome F´ porte le répresseur lacIq pour une expression inductible à partir des promoteurs trc, tac et lac utilisant l’IPTG.

Les cellules compétentes en TOP10F´ sont transformées par électroporation, atteignant ainsi des efficacités de transformation plus élevées que les cellules chimiquement compétentes et peuvent être utilisées dans des applications plus complexes, notamment le clonage d’une faible quantité d’ADN ou d’ADNc et la construction de bibliothèques d’ADNg. Ces cellules permettent une réplication stable des plasmides à grand nombre de copies et sont fournies avec une efficacité de transformation de >1 x 10¹⁰ cfu/ μg d’ADN superenroulé, idéales pour le clonage et la propagation des plasmides à haute efficacité.

En tant que dérivé de TOP10, les cellules TOP10F´ portent des mutations dans le système de restriction dépendant de la méthylation (mcrA, mcrBC et mrr), permettant de cloner à la fois de l’ADN génomique procaryote et eucaryote, ainsi qu’un sauvetage efficace des plasmides à partir de génomes eucaryotes. Comme pour d’autres souches DH, la TOP10 souche possède aussi des mutations recA1 et A1 terminalepour augmenter la stabilité des inserts et améliorer la qualité de l’ADN plasmidique préparé à partir de minipreps.

Les cellules Kit E. coli TOP10F´ Electrocomp offrent :
• Efficacités de transformation de >1 x 10¹⁰ cfu/μg•
épisome F´ stable qui permet l’isolement de ssDNA et transporte un inhibiteur lacIq pour une expression inductible à partir des promoteurs  •
trc, tac et lac hsdR pour une transformation efficace de l’ADN non méthylé à partir d’amplifications
• PCR mcrA pour une transformation efficace de l’ADN méthylé à partir de préparations
• génomiques lacZΔM15 pour le criblage bleu/blanc des clones recombinants sur des plaques contenant soit X-Gal soit Bluo-Gal•
extrémité A1, pour des préparations d’ADN plus propres et de meilleurs résultats en applications en aval grâce à l’élimination de la digestion non spécifique par l’endonucléase I•
recA1 pour réduire la fréquence de la recombinaison non spécifique dans l’ADN

cloné Note : Les cellules TOP10F´ nécessitent une induction IPTG pour le cribillage bleu-blanc. Un appareil d’électroporation haute tension est également nécessaire.

Génotype
F´ [lacIq, Tn10(TetR)] mcrA Δ(mrr-hsd RMS-mcr BC)φ 80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu) 7697 galU galK rpsL(StrR) extrémitéA1 nupG

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• Nous offrons d’autres souches DH en cellules chimiquement compétentes et électrocompétentes.
Cuvettes d’électroporation de 0,1 cm (Cat. No P41050), 0,2 cm (Cat. Non. P45050), et 0,4 cm (cat. Non. P46050) sont disponibles.
•  La TOP10 déformation est disponible en plusieurs MultiShot formats pour des applications à haut débit.
•  Nous offrons d’autres souches pour la production d’ADNss, comme DH12S (Cat. Non. 18312017).