Invitrogen™ eBioscience™ Kits de détection d’apoptose Annexin V

Les annexines sont une famille de protéines liant les phospholipides dépendantes du calcium qui se lient préférentiellement à la phosphatidylsérine (PS). Dans des conditions physiologiques normales, la PS est principalement située dans la foliole interne de la membrane plasmique. À l’initiation de l’apoptose, la PS perd sa distribution asymétrique à travers la bicouche phospholipidique et est translocée vers la membrane extracellulaire, marquant les cellules comme cibles de phagocytose. Une fois sur la surface externe de la membrane, le PS peut être détecté par l’annexe V marquée fluorescentement de manière dépendante du calcium.

Dans l’apoptose à un stade précoce, la membrane plasmique exclut les colorants de viabilité tels que l’iodure de propidium (PI), le 7-AAD ou les colorants de viabilité réparables comme eFluor le 450. Ces cellules se colorent avec de l’annexine V mais sans un colorant viable, distinguant ainsi les cellules en début d’apoptose. Cependant, lors de l’apoptose avancée, la membrane cellulaire perd son intégrité, permettant ainsi à l’annexine V d’accéder aussi à la PS à l’intérieur de la cellule. Un colorant de viabilité peut être utilisé pour résoudre ces cellules apoptotiques et nécrotiques de stade avancé (annexine V, colorant de viabilité positif) des cellules apoptotiques de stade précoce (annexe V positive, colorant de viabilité négative).

Les colorations de viabilité actuellement disponibles avec les kits de détection d’apoptose eBioscience Annexin V incluent FITC, eFluor 450, allophycocyanine (APC), phycoythrine (PE), PE-cyanine7 et biotine.